Questão 87259 de Biologia - PORTAL CONCURSOS 2025

Questão

ID 87259

Disciplina: Biologia

Assunto: Aplicações de OGMs

Ano: 2025 Banca: PORTAL CONCURSOS Órgão: PORTAL CONCURSOS

O Sistema de Duplo Híbrido em Levedura (Yeast Two-Hybrid, Y2H) é uma técnica poderosa para identificar interações proteína-proteína 'in vivo'. O sistema explora a natureza modular de alguns fatores de transcrição eucarióticos, como o GAL4 da levedura, que possui um domínio de ligação ao DNA (BD - Binding Domain) e um domínio de ativação da transcrição (AD - Activation Domain) que podem funcionar mesmo quando separados. No sistema Y2H clássico, a 'isca' (proteína X) é fusionada ao BD, e a 'presa' (proteína Y) é fusionada ao AD. Se as proteínas X e Y interagem, o BD e o AD são aproximados, reconstituindo um fator de transcrição funcional que ativa a expressão de genes repórteres (e.g., HIS3, lacZ), permitindo o crescimento da levedura em meio seletivo ou a produção de cor. Qual das seguintes situações resultaria em um resultado 'falso-positivo' no ensaio de Y2H?

Alternativa A:
A proteína 'isca' (X-BD) é expressa, mas a proteína 'presa' (Y-AD) não é, impedindo qualquer interação e, consequentemente, o crescimento em meio seletivo.
Alternativa B:
A proteína 'isca' (X-BD), por si só, possui um domínio de ativação transcricional intrínseco, sendo capaz de ativar o gene repórter mesmo na ausência da proteína 'presa' (Y-AD).
Alternativa C:
As proteínas X e Y interagem fortemente no citoplasma da levedura, mas o complexo formado não consegue ser transportado para o núcleo, onde os genes repórteres estão localizados.
Alternativa D:
A fusão da proteína X ao BD impede seu enovelamento correto, tornando-a incapaz de interagir com a proteína Y, mesmo que essa interação ocorra naturalmente na célula.
Alternativa E:
O meio de cultura seletivo utilizado para o crescimento da levedura contém histidina, mesmo que o gene repórter seja o HIS3, que confere prototrofia para histidina.

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