Questão 87256 de Biologia - PORTAL CONCURSOS 2025

Questão

ID 87256

Disciplina: Biologia

Assunto: Tecnologia do DNA Recombinante

Ano: 2025 Banca: PORTAL CONCURSOS Órgão: PORTAL CONCURSOS

A tecnologia de DNA recombinante permite a produção de proteínas de interesse terapêutico em sistemas de expressão heterólogos. A insulina humana, por exemplo, foi uma das primeiras proteínas farmacêuticas produzidas em bactérias (E. coli). A proteína da insulina é sintetizada como uma molécula precursora, a proinsulina, que consiste nas cadeias A e B conectadas por um peptídeo C. Para se tornar ativa, a proinsulina precisa ser clivada para remover o peptídeo C e as cadeias A e B devem ser unidas por pontes dissulfeto. Como E. coli não possui a maquinaria celular para realizar esse processamento pós-traducional corretamente, a estratégia industrial inicial foi complexa. Qual foi a abordagem pioneira utilizada pela Genentech para produzir insulina humana recombinante em E. coli?

Alternativa A:
Expressar o gene da proinsulina humana completo em E. coli, purificar a proinsulina e então tratá-la 'in vitro' com enzimas proteolíticas para remover o peptídeo C e agentes químicos para formar as pontes dissulfeto.
Alternativa B:
Sintetizar e clonar os genes da cadeia A e da cadeia B separadamente, em plasmídeos diferentes e em culturas de E. coli distintas. Purificar cada cadeia individualmente e então uni-las quimicamente 'in vitro' para formar as pontes dissulfeto e a insulina ativa.
Alternativa C:
Co-expressar em E. coli o gene da proinsulina humana juntamente com os genes das proteases humanas responsáveis pela sua clivagem, para que o processamento ocorresse dentro da própria bactéria.
Alternativa D:
Utilizar um sistema de expressão em leveduras (S. cerevisiae), que, por serem eucariotos, possuem a capacidade de processar e secretar a insulina corretamente processada para o meio de cultura.

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