Questão 87220

A tecnologia de 'Phage Display' é uma poderosa ferramenta de biologia molecular utilizada para selecionar peptídeos, anticorpos ou outras proteínas com alta afinidade e especificidade por um alvo de interesse. A técnica se baseia na fusão do gene que codifica a proteína de interesse ao gene de uma proteína do capsídeo de um bacteriófago (um vírus que infecta bactérias), resultando na 'exibição' (display) da proteína na superfície do vírion. Uma biblioteca de fagos, cada um exibindo uma variante diferente da proteína, é então submetida a rodadas de seleção contra o alvo imobilizado, um processo chamado de 'panning'. Sobre os princípios do Phage Display, analise as proposições:

I. A grande vantagem da técnica é a ligação física direta entre o fenótipo (a proteína exibida) e o genótipo (o gene correspondente dentro do fago), o que permite que, após a seleção das partículas de fago que se ligam ao alvo, o gene da proteína de interesse possa ser facilmente recuperado, sequenciado e clonado para produção em larga escala.

II. O processo de 'panning' envolve etapas de ligação, lavagem e eluição. A etapa de lavagem é crítica para a seletividade do processo, pois lavagens com alta adstringência (usando, por exemplo, altas concentrações de sal ou detergentes) removem os fagos que se ligam de forma fraca e inespecífica, enriquecendo a população com ligantes de alta afinidade.

III. A técnica não é limitada à seleção de proteínas pequenas, como peptídeos, pois a fusão de proteínas grandes, como fragmentos de anticorpos (scFv ou Fab), com a proteína do capsídeo do fago geralmente permite a montagem correta do vírion, mantendo a partícula infecciosa.

Assinale a alternativa que contém a análise correta das proposições.