Questão 86971

Ao expressar proteínas heterólogas em E. coli, um problema comum é a formação de corpos de inclusão, que são agregados insolúveis da proteína de interesse. Este fenômeno, embora resulte em altos níveis de produção, torna a purificação da proteína ativa um processo complexo. Sobre a formação de corpos de inclusão, analise as afirmativas:

I. A formação de corpos de inclusão é frequentemente causada por altas taxas de síntese proteica, que sobrecarregam a maquinaria de enovelamento da célula, como as chaperonas.

II. A otimização do uso de códons do gene de interesse para corresponder à frequência de tRNAs da E. coli pode reduzir a formação de corpos de inclusão ao diminuir a velocidade de tradução e permitir o enovelamento co-traducional adequado.

III. A solubilização de corpos de inclusão tipicamente requer o uso de agentes desnaturantes fortes, como ureia ou cloridrato de guanidínio, seguida por um processo de renaturação gradual (refolding) para recuperar a proteína ativa.

Está correto o que se afirma em: