Questão 86955 de Biologia - PORTAL CONCURSOS 2025

Questão

ID 86955

Disciplina: Biologia

Assuntos: Tecnologia do DNA Recombinante, Ácidos Nucleicos

Ano: 2025 Banca: PORTAL CONCURSOS Órgão: PORTAL CONCURSOS

A mutagênese sítio-dirigida é uma poderosa ferramenta para estudar a função de proteínas, permitindo a alteração de aminoácidos específicos. Um método popular envolve o uso de PCR com primers que contêm o 'mismatch' desejado. Após a amplificação de todo o plasmídeo contendo o gene de interesse, o DNA molde original (parental) precisa ser eliminado para garantir que apenas os plasmídeos mutados sejam recuperados após a transformação. Qual enzima é comumente utilizada para digerir seletivamente o DNA molde parental metilado, e qual a base dessa seletividade?

Alternativa A:
A enzima BamHI, que reconhece e cliva apenas o DNA que foi metilado pela célula hospedeira.
Alternativa B:
A enzima Taq polimerase, que possui uma atividade nuclease que degrada o DNA molde durante os ciclos de PCR.
Alternativa C:
A enzima DpnI, uma endonuclease de restrição que cliva especificamente sequências GATC que estão metiladas em ambas as fitas na adenina, uma característica do DNA replicado em cepas de E. coli dam+, enquanto o DNA sintetizado in vitro pela PCR não é metilado.
Alternativa D:
A enzima fosfatase alcalina, que remove os grupos fosfato do DNA molde, marcando-o para degradação pela célula.
Alternativa E:
A enzima Exonuclease III, que digere o DNA parental a partir de quebras na fita (nicks) que não estão presentes no DNA recém-sintetizado.

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