Questão 86915 de Biologia - PORTAL CONCURSOS 2025

Questão

ID 86915

Disciplina: Biologia

Assunto: Tecnologia do DNA Recombinante

Ano: 2025 Banca: PORTAL CONCURSOS Órgão: PORTAL CONCURSOS

A clonagem molecular é uma técnica fundamental na biotecnologia moderna, permitindo a produção de múltiplas cópias de um fragmento de DNA específico. O processo clássico envolve a digestão de um vetor de clonagem e do DNA de interesse com enzimas de restrição, seguida pela ligação dos fragmentos compatíveis pela DNA ligase. Um desafio comum nesta abordagem é a recircularização do vetor sem o inserto, o que pode diminuir drasticamente a eficiência da clonagem. Para mitigar este problema, pesquisadores frequentemente empregam o tratamento do vetor digerido com fosfatase alcalina. Considerando o mecanismo de ação da DNA ligase e da fosfatase alcalina, qual é a consequência molecular precisa do tratamento com fosfatase alcalina no vetor linearizado que impede sua recircularização?

Alternativa A:
A fosfatase alcalina remove os grupos hidroxila 3' das extremidades do vetor, impedindo que a DNA ligase forme a ligação fosfodiéster.
Alternativa B:
A enzima remove os grupos fosfato 5' das extremidades do vetor, bloqueando a formação da ligação fosfodiéster necessária para a circularização, mas ainda permitindo a ligação com o inserto que possui grupos fosfato 5' intactos.
Alternativa C:
A fosfatase alcalina adiciona grupos metil às extremidades do vetor, criando um impedimento estérico que previne a ação da DNA ligase.
Alternativa D:
O tratamento desnatura as extremidades coesivas do vetor, tornando-as incompatíveis para a ligação, forçando a ligação apenas na presença do inserto.
Alternativa E:
A fosfatase alcalina cliva uma pequena sequência de nucleotídeos em ambas as extremidades 5' do vetor, tornando-o ligeiramente mais curto e incompatível para a autoligação.

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