Questão 66886

Química · 2025

Questão

ID 66886

Disciplina: Química

Assuntos: Cromatografia, Eletroforese

Ano: 2025 Banca: PERFIL - ENADE Órgão: Quarto Simulado Pnd

O método de Sanger, ou método de didesoxi, foi o primeiro método de sequenciamento de DNA em larga escala. A técnica se baseia na síntese de DNA in vitro na presença de nucleotídeos normais (dNTPs) e uma pequena quantidade de didesoxinucleotídeos (ddNTPs), que não possuem o grupo 3'-OH. Qual é a função do ddNTP na reação de sequenciamento de Sanger?

Alternativa A:
Atua como iniciador (primer) para a DNA polimerase.
Alternativa B:
Quando um ddNTP é incorporado pela DNA polimerase na cadeia em crescimento, a síntese de DNA é terminada, pois a ausência do grupo 3'-OH impede a formação da próxima ligação fosfodiéster. O uso de ddNTPs marcados para cada base (A, C, G, T) gera um conjunto de fragmentos de diferentes tamanhos, todos terminando em uma base específica, que podem ser separados por eletroforese para ler a sequência.
Alternativa C:
Desnatura a dupla hélice de DNA.
Alternativa D:
Corta o DNA em sítios de restrição específicos.
Alternativa E:
Marca o início da sequência de DNA.

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