Questão 2994525

O tempo entre coleta e estabilização e a temperatura de armazenamento posterior; atrasos ou armazenamento inadequado degradam RNA e comprometem quantificação.

A escolha da enzima de transcriptase reversa utilizada na reação de retrotranscrição, pois todas as diferenças são compensadas pela normalização.

A inclusão de um gene housekeeping sem validação prévia para o tipo tecidual, pois não altera a integridade do RNA.

O uso de primers com Tm muito próximo entre si, pois afeta apenas a eficiência, não a pré-analítica.

O volume final da reação de PCR. Alterações no volume não interferem na integridade do RNA extraído.