Questão 2728435

A amostra utilizada não precisa ser esterilizada, pois o DNA ou RNA estão no interior do núcleo protegido pela membrana celular e pela carioteca.

A adição do agente quelante EDTA também auxilia na ativação da ação das DNases por se ligar aos cofatores Ca+2 e Mg+2 da enzima DNase.

O NaCl contribui fortalecendo ligações iônicas das cadeias peptídicas, auxiliando na desnaturação das proteínas e promovendo a aglomeração das moléculas de DNA.

A lise celular para a extração do DNA ou do RNA deve ser realizada em soluções tamponadas, geralmente contendo um detergente e os reagentes tris-hidroximetil aminometano (Tris), cloreto de sódio (NaCl) e ácido etilenodiaminotetracético (EDTA).

O detergente mantém o pH da solução tampão de lise estável, próximo a 8,0, evitando que o DNA, ao ser liberado, sofra o ataque das enzimas desoxirribonucleases (DNases) endógenas.