Questão
ID 1791461Disciplina: Biomedicina
Assunto: Citometria de Fluxo
Ano: 2019 Banca: FUNPAR NC UFPR - Universidade Federal do Paraná Órgão: Prefeitura Municipal de Matinhos
As células normais, que são resistentes à morte por lise autóloga mediada pelo complemento, possuem um sistema proteico regulador na membrana citoplasmática, sendo o DAF e o MIRL seus representantes principais, também conhecidos como CD55 e CD59, respectivamente. Ambos são de natureza glicoproteica e podem ser encontrados ancorados na membrana celular por meio da glicosil-fosfatidil-inositol (GPI). A deficiência desses marcadores resulta em patologias como a hemoglobinúria paroxística noturna (HPN), por exemplo. Por utilizar anticorpos monoclonais específicos, a citometria de fluxo tem sido cada vez mais empregada como uma opção para ajudar no diagnóstico laboratorial de várias patologias, pois é capaz de avaliar a expressão de uma infinidade de marcadores, como o CD55 e o CD59, por exemplo, com alta sensibilidade e especificidade. Nessa técnica, as células da amostra são marcadas com anticorpos monoclonais específicos ligados a fluorocromos, que permitem a identificação das células pelas suas propriedades de tamanho (FSC) e granulosidade (SSC), e a quantificação pela intensidade de fluorescência (geralmente em escala logarítmica), representados em gráficos de pontos (dot plots). Ou seja, em uma suspensão celular, a porcentagem de células com aumento ou deficiência na expressão do marcador é reflexo direto da presença ou não das células em estudo, e esses dados têm importância diagnóstica e, muitas vezes, prognóstica.
Os gráficos abaixo foram obtidos de amostras de cinco pacientes com suspeita de HPN, em que as células do sangue periférico foram submetidas a marcação com anticorpos monoclonais anti-CD55 e anti-CD59 conjugados, respectivamente, com ficoeritrina (PE) e isotiocianato de fluoresceína (FITC), e, em seguida, analisadas em um citômetro de fluxo. (Adaptado de Rocha, J.M.C. et al. Detecção de células com fenótipo HPN por citometria de fluxo utilizando análise multiparamétrica. J Bras Patol Med Lab, 50(2):105-14. 2014.)
