Questão 1781391

A coleta dos espectros deve ser feita exclusivamente em modo refletor negativo, com alta resolução e baixa frequência de laser, para aumentar a sensibilidade aos metabólitos secundários.

O uso de culturas bacterianas envelhecidas e meios seletivos enriquecidos é preferível, pois maximiza a expressão de proteínas regulatórias específicas para diferenciação clonal.

Para obtenção de espectros representativos, recomendase a aplicação direta da colônia sobre a placa MALDI sem extração química, evitando a diluição dos picos específicos de biomarcadores.

A criação de um espectro principal (Main Spectrum Profile, MSP) a partir de múltiplas aquisições replicadas e vários isolados da mesma cepa permite minimizar variabilidades técnicas e facilita a construção de dendrogramas reprodutíveis entre laboratórios.

O ajuste do algoritmo PCA deve priorizar exclusivamente a intensidade dos picos principais, independentemente da razão massa/carga, visto que a razão m/z tende a variar conforme o tempo de incubação.