Questão 127154

A terapia gênica envolve a substituição de um gene defeituosoou mutado por outro do tipo selvagem ou sem mutação. Talprocesso requer o uso de um vetor viral, e deve sempre serrealizada in vivo, diretamente na célula alvo do indivíduo a sertratado, para evitar perda do vírus.

O southern é uma técnica que detecta fragmentos de DNA,podendo ser utilizada para averiguar, por hibridação com umasonda radiotivamente marcada, a presença tanto de grandesrearranjos cromossômicos, quanto de mutações pontuais, deapenas um par de bases nitrogenadas.

Na técnica de PCR, para que seja possível a detecção de trêsisoformas distintas de um mesmo gene, a partir de um únicopar de primers (iniciadores), basta que eles se anelem a umasequência que seja comum a todas as isoformas.

As enzimas de restrição, ou endonucleases, permitem que umgene seja clonado em um vetor, porém não permitem a ligaçãode mais de dois fragmentos, como por exemplo, dois insertose um vetor.

Para se obter uma biblioteca genômica é preciso submeter ogenoma do organismo de interesse a uma digestão com umaenzima de restrição e, em seguida, clonar individualmente osdiversos fragmentos em um vetor desejável.